全能核酸酶
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产品概述

Benzonase是一种来源于Serratia Marcescen的基因工程酶。本品可将核酸降解成2-5个碱基的5’单磷酸核苷酸,因其能高效降解任何形式(双链,单链,线状,环状)的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性,又被称为“全能核酸酶”。该酶可在广泛的条件下能保持很高的稳定性和消化活力,高效地降解所有形式的RNA和DNA,因此被广泛用于去除生物制品中的核酸残留和污染,提升样本纯度和制品生物功效。本品利用大肠杆菌(E.coli)大规模发酵表达纯化,在科研与生产工艺中可降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,能提高蛋白纯化效率并用于后续功能研究。

产品组分

货号SPE0101-01SPE0101-02
规格100KU250KU
体积400 μl1 ml

产品信息

产品名称Benzonase
来源E. coli
分子量26.8 KD
等电点6.39
蛋白纯度≥ 95%(SDS-PAGE)
酶活≥ 250 U/μl
比活≥ 1.5×106 U/mg 蛋白
最适pH8.0
最适温度37℃
辅助因子1 - 10 mM Mg2+
储存缓冲液20 mM Tris-HCl (25℃,pH 8.0) ,2 mM MgCl2,20 mM NaCl and 50% Glycerol
活性单位定义37℃,pH 8.0 反应条件下,2.625 ml反应体系中,在 30 min内使△A260 吸收值变化 1.0 所用的酶量定义为一个活性单位(U)。(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA的酶量)

保存、运输条件

Ø -30 ~ -15℃保存,≤0°C运输。不建议长期2 ~ 8℃储存,如需要,建议无菌过滤。

Ø 有效期3年,避免反复冻融。

反应条件

条件最佳浓度范围有效浓度范围
Mg2+1 - 2 mM1 - 10 mM
pH8.0 - 9.06.0 - 10.0
温度37℃0 - 42℃
DTT0 - 100 mM> 100 mM
β-ME0 - 100 mM> 100 mM
Na+, K+,etc0 - 20 mM0 - 150 mM
PO43-0 - 10 mM0 - 100 mM

最佳条件定义为酶活性保留90%以上的反应条件;有效条件定义为酶活性保留15%以上的反应条件。

适用场景

Ø 用于除去生物制品中的DNA/RNA,使生物制品的最终核酸含量符合要求,同时提高生物制品功效。

Ø 用于降低细胞破碎后的粘度,提高蛋白得率,改善分离效果,使之易于过滤,利于下游层析纯化操作。

Ø 用于细胞培养来源产物的纯化过程,降解细胞裂解液中的核酸,提高重组蛋白产量。

Ø 用于细胞工程等,以防止细胞聚集结团。

Ø 处理用于ELISA、电泳等分析,或柱层析纯化的含有核酸的蛋白样品,提高分辨率和回收率。

注意事项

Benzonase的抑制条件:

本产品可被一定的盐浓度抑制活性,例如: > 100 mM的一价阳离子(如Na+、K+等), > 10 mM的二价Ca2+离子, > 100 mM的盐酸胍(guanidine HCl), > 20 mM的磷酸盐(phosphate), > 25 mM的硫酸铵(ammonium sulfate)等,可抑制该酶50%左右活性。

此外,螯合剂也可通过螯合体系中的Mg2+以达到抑制酶活的作用,通过加入更多Mg2+可恢复Benzonase的活性(1 mM的EDTA可部分抑制Benzonase活性,5 mM的EDTA可使其活性丧失约90%)。

※1 - 2 mM Mg2+离子对于此酶活性的保持至关重要。

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