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产品概述
Pfu DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Pyrococcus furiosus的高度热稳定的DNA聚合酶。Pfu酶的分子量为90kDa。Pfu酶可以催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。和Taq酶不同,Pfu酶有3'至5'的外切酶活性(proofreading activity)。另外,Pfu酶有5'至3'外切酶活性,但Pfu酶没有反转录酶活性。由于Pfu酶有3'至5'的外切酶活性,因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低。Pfu的出错率远远低于Taq酶,因此Pfu酶常作为首选的高性价比的高保真DNA聚合酶。
产品组分
酶活定义
用活化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃ 30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
保存、运输条件
Ø -20°C保存, ≤0℃冰袋运输,避免反复冻融。
Ø 有效期1年,避免反复冻融。
适用场景
本产品适用于以基因组DNA、cDNA、Plasmid DNA以及粗品为模板的PCR反应:
Ø 高保真 PCR及载体构建; 基因克隆;
Ø 基因定点突变;
Ø 高通量 PCR及测序。
注意事项
Ø 请使用高质量的模板。
Ø 请勿使用dUTP和带有尿嘧啶的引物和模板。
Ø Pfu酶有3’至5’的外切酶活性,在没有dNTP的情况下可以降解引物。因此Pfu酶一定要最后加入,并且要在冰浴上操作。
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