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mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase (2'氧甲基转移酶)为重组E.coli表达的牛痘病毒DNA编码的一种甲基转移酶。该酶利用S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosylmethionine,SAM)为甲基供体,在RNA 5'端紧邻帽结构(Cap0)的第一个核苷酸的2'-O位点添加甲基基团,形成带有Cap1结构的mRNA。Cap1结构能够增强mRNA的翻译效率,并且降低mRNA结构本身的免疫原性,因此有助于改善mRNA转染后编码蛋白的表达水平。2'氧甲基转移酶特异性识别7-甲基鸟苷帽结构(m7GpppN,Cap0),不会作用于5'端为pN,ppN,pppN或GpppN的RNA。
产品组分
酶活单位定义
37℃,pH 8.0条件下,1小时内使10 nmol 80 nt带有m7Gppp帽结构的寡核苷酸转录产物甲基化所需要的酶量定义为1个活性单位。保存、运输条件
Ø 储存缓冲液:20 mM Tris-HCl (25℃,pH 8.0),100 mM NaCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.1% Triton X-100, 50% Glycerol
Ø 储存条件:-30 ~ -15℃,避免反复冻融,≤0°C运输。
适用场景
提高mRNA转染后的翻译表达效率,并降低mRNA在体内的免疫原性。
工作条件
Ø 最适温度:37℃
Ø 转录缓冲液 (1x):50 mM Tris-HCl (25℃,pH 8.0),5 mM KCl,1 mM MgCl2,1 mM DTT
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