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产品概述
Spscript III Reverse Transcriptase是通过体外大肠杆菌表达体系分子进化技术筛选获得的全新逆转录酶,与原始逆转录酶相比, Spscript III Reverse Transcriptase大幅提高了热稳定性,在50℃的半衰期超过4h, 可将逆转录温度提高至50-55℃,避免RNA复杂二级结构对cDNA合成的抑制,可有效合成高质量的cDNA。 同时, Spscript III Reverse Transcriptase增加了多个点突变,增强了模板亲和力和行进性,使得全长cDNA的合成能力有了大幅度提升,对于常见的逆转录抑制物具有更高的耐受度,非常适合于富含多糖多酚的植物组织RNA的逆转录反应。
产品组分
酶活定义
Ø 以Poly(rA)·Oligo(dT)为模板/引物,在37℃, 10 min条件下,掺入1 nmol的dTTP为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
保存、运输条件
Ø -30 ~ -15℃保存, ≤0℃运输。
Ø 有效期2年,避免反复冻融。
使用方法
1. 在RNase-free离心管中配制如下混合液:
2. 轻轻混匀。
3. 50℃ 45 min, 70℃ 15 min。
4. 产物于-20℃保存。
适用场景
本产品广泛适用于动物、植物以及微生物RNA的逆转录反应:
Ø RT-PCR扩增;
Ø 链cDNA合成;
Ø 制备cDNA探针;
Ø 合成具有高比例全长cDNAs的cDNA文库。
注意事项
1. 防止RNase污染
Ø 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase-free。
2. 引物选择
Ø 后续实验为PCR
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