产品概述

E.coli Poly(A)Polymerase为重组E.coli表达的一种聚合酶。该酶不依赖模板，可以催化 ATP 以 AMP 的形式依次掺入到 RNA  3'末端，即在RNA 3'端加多聚腺苷尾。Poly(A)结构能够提高 RNA 的稳定性并提高mRNA在真核细胞中的翻译效率。Poly(A)聚合酶具有很高的加尾效率，能够在RNA 3'端加入20 - 200个A碱基。

产品组分  

酶活单位定义

37℃，pH 8.0条件下，10分钟内使1 nmol AMP掺入RNA所需要的酶量定义为1个活性单位。

保存、运输条件

Ø 储存缓冲液：20 mM Tris-HCl (25℃，pH 7.5)，300 mM NaCl，1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% Triton X-100，50% Glycerol

Ø 储存条件：-20℃，避免反复冻融，≤0°C运输。

适用场景

Ø 提高mRNA在真核细胞中的翻译效率。

Ø 用于RNA 3'端标记。

Ø 为RNA加上Poly(A)尾，用于克隆或纯化。

工作条件

Ø 最适温度：37℃

Ø 加尾工作液 (1x)：50 mM Tris-HCl (25℃，pH 7.9)，250 mM NaCl，10 mM MgCl2。

Ø 建议反应体系：

注意事项

Ø 本反应加入的Poly(A)尾长度受酶量、ATP浓度和反应时间等因素影响，一般本酶在37℃反应30 min可加~30个A碱基，60 min可加~100个A碱基。

Ø 本酶将AMP添加到RNA的3'端具有较高的选择性，并不会在所有RNA分子中添加相同长度的Poly(A)。

Ø 本酶的作用底物只能是RNA，且需要有Mg2+等二价离子才能发挥活性。