产品概述

本产品由克隆有Thermus aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌表达并经过多步纯化精制得到，不含核酸内切酶、核酸外切酶以及细菌DNA。 Taq DNA Polymerase具有5'→ 3'聚合酶活性和5'→ 3'外切酶活性，但无3'→ 5'外切酶活性。

产品组分  

酶活定义

用活化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物， 74℃ 30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。

保存、运输条件

Ø -20°C保存， ≤0℃冰袋运输，避免反复冻融。

Ø 有效期1年，避免反复冻融。

适用场景

本产品广泛适用于动物，植物以及微生物等DNA的扩增反应：

Ø PCR法扩增DNA：小片段目标基因克隆。DNA序列测定。

Ø DNA标记：标记 DNA 3’-末端。

Ø 常规 PCR 鉴定以及平端 PCR 产物加“A”。

质量控制

Ø 核酸外切酶残留检测：10U的本酶和0.6 μg λ-HindIII在37℃下孵育16 h，DNA的电泳谱带不发生变化。

Ø 核酸内切酶残留检测：10U的本酶和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带不发生变化。

Ø RNase残留检测：10U的本酶和1 μg HeLa细胞总RNA在37℃下孵育1 h，RNA的电泳谱带不发生变化。

Ø 大肠杆菌基因组残留检测：10U本品中残留的核酸经E.coli16S   rDNA特异性的TaqMan    qPCR检测，E.coli基因组残留低于10拷贝。

Ø 功能检测：50μl   PCR体系中加入1.25U本酶，以100  ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsingene。30个循环后将1/10 PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的360 bp条带。

注意事项

由于Taq DNA Polymerase在室温下也有一定的反应活性， PCR反应体系请在冰上进行配制，之后再置于PCR仪上进行反应。这样可以减少在反应准备阶段发生的非特异扩增，有助于得到高特异性的扩增结果。