产品概述

热启动HS Taq DNA Polymerase是经过化学修饰的Taq DNA Polymerase， 在室温下活性被完全封闭，只有经过95℃加热后活性才被释放，可防止在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增和引物二聚体。与基于抗体的热启动Taq酶相比， 热启动 HS Taq DNA Polymerase活性封闭更彻底，严谨性更高；与现有经化学修饰的热启动HS Taq酶相比， 热启动 HS Taq DNA Polymerase 的激活时间只需要 5min， 兼容现有的PCR程序。 热启动HS Taq DNA Polymerase配合优化的缓冲体系，可最大程度的减少非特异扩增和引物二聚体，带来极高的灵敏度和特异性，非常适合于从复杂模板中扩增低拷贝基因。

产品组分

酶活定义

Ø 用活化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物, 74℃ 30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。

保存、运输条件

Ø -30 ~ -15°C保存， ≤0℃冰袋运输，避免反复冻融。

Ø 有效期2年，避免反复冻融。

适用场景

本产品广泛适用于动物，植物以及微生物等DNA的扩增反应：

Ø 热启动酶因具有 5’-3’核酸外切酶活性，可用于荧光定量 PCR 反应。采用热启动法扩增是提高 PCR 特异性的常用方法，热启动酶是很好的选择。

Ø 除此之外，因其具有的高特异性高灵敏度被广泛应用到各个方面：构建 cDNA 文库，产生大量 DNA 测序，突变体分的析构建，基因分离，遗传病诊断，法医鉴定等。

注意事项

引物设计:

1. 引物3'端最后一个碱基最好为G或者C；

2. 引物3'端最后8个碱基应避免出现连续错配；

3. 引物3'端应避免出现发夹结构；

4. 正向引物和反向引物的Tm值相差不超过1℃为佳， Tm值调整至55 ~ 65℃为佳(引物Tm值推荐使用Primer Premier 5进行计算)；

5. 引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；

6. 引物的GC含量控制在40% - 60%之间；

7. 引物A、 G、 C、 T整体分布要尽量均匀，避免使用GC或者AT含量高的区域；

8. 避开引物内部或者两条引物之间有5个碱基以上的互补序列，两条引物的3'端避免有3个碱基以上的互补序列；

9. 引物设计完毕请使用NCBI BLAST功能检索引物特异性，以避免非特异性扩增产生。