产品概述

在进行常规PCR分析时，高GC含量的DNA片段因其稳固的二级结构常常难于扩增。在普通PCR反应条件下，DNA聚合酶很难介入到高 GC含量的DNA二级结构中。PCR Enhancer是由多种成分组成的混合添加剂，能够有效降低高GC模板和具有复杂二级结构模板的解链温度，且几乎兼容所有DNA聚合酶的扩增体系。当常规PCR程序无法有效扩增目的片段时，加入PCR Enhancer往往能得到意想不到的结果。

产品组分  

质量控制 

功能检测：50 μl PCR体系中加入10 μl本品，以5 ng质粒为模板，分别扩增GC含量在60% - 80%之间的3个不同目的片段。35个循环后将1/10 PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的相应条带。

保存、运输条件

Ø  -20℃保存， ≤0℃运输。

Ø  保存3年，避免反复冻融。

适用场景

以如下反应为例，用Taq DNA Polymerase扩增GC含量为72%的片段。

反应体系

反应程序

a.不同模板最佳反应浓度不同，下表为50 µl反应体系推荐模板使用量：

b. 该预变性条件适合绝大多数扩增反应，可根据模板结构复杂程度修改。如模板结构复杂，可将预变性时间延长至5 - 10 min以提高预变性效果。

c.退火温度需要根据引物的Tm值进行调整，一般设置成低于引物Tm值3 ~ 5℃即可；对于复杂模板，需要调节退火温度和延长延伸时间来实现高效扩增。

适用场景

Ø 本产品可能会降低PCR的保真度。因此，在进行高保真PCR时慎用。

Ø  本产品浓度为5 ×，推荐终浓度为1 ×通常 50 μl PCR 的反应体系中可加入 200 ng。