鼠核糖核酸酶抑制剂
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产品概述

Murine RNase Inhibitor是在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,可通过非竞争方式1:1与RNase A、 B或C结合,从而抑制三种酶的活性,保护RNA不被降解。 Murine RNase Inhibitor是基于热稳定性的RNase抑制剂,即使使用热稳定性逆转录酶的条件下也具有抑制活性, 与各种商业化Reverse Transcriptase和DNA Polymerase兼容。

产品组分

货号GA0101
Murine RNase Inhibitor40 U/µl
包装规格250µl(其他规格可定制)
酶活定义

Ø 抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

Ø RNase A的活性通过抑制Cyclic 2', 3'-CMP水解生成3'-CMP定量测定。

保存、运输条件

Ø -20℃保存, ≤0℃运输。

Ø 有效期2年,避免反复冻融。

使用方法

1. 在RNase-free离心管中配制如下混合液:

RNase-free ddH2Oto 20 μl
5 × Reverse Buffer4 μl
Oligo (dT)18 (50 µM)1 μl
dNTP Mix (10 mM each)1 μl
Murine RNase Inhibitor (40 U/µl)1 μl
Reverse Transcriptase (200 U/µl)1 μl
模板RNA10 pg - 2.5 μg

2. 轻轻混匀。

3. 50℃ 45 min, 70℃ 15 min。

4. 产物于-20℃保存。

适用场景

本品可在任何可能存在RNase干扰的应用中使用,以避免RNA降解,如:

Ø cDNA第一链合成, RT-PCR(PCR及qPCR系统中均可使用)。

Ø 在体外转录/翻译(如病毒体外复制体系)中对RNA进行保护。

Ø 在RNA分离纯化过程中抑制RNase的活性。

Ø RNase保护实验。

注意事项

Ø 抑制剂的活性温度为25 ~ 55℃,在65℃及以上温度下失活。

Ø 抑制RNase活性的pH值范围较广(pH 5.0 - 9.0均有活性),在pH 7.0 - 8.0时表现最大活性。

Ø 起泡或剧烈搅拌(Vortex等)会引起失活。

Ø 不抑制RNase H及RNase T1活性。

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