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Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(末端脱氧核苷酸转移酶,TdT)是一种模板非依赖型 DNA 聚合酶,催化脱氧核 苷酸重复添加到寡核苷酸、单链和双链 DNA 的 3'羟基端。TdT 反应需要含有至少 3 个碱基的短序列作为引物。以 RNA 为模板时,TdT 性能严格依赖于受体 RNA 3’-末端的三级结构和核苷酸的种类。一般 TdT 对 RNA 模板的作用效率比 DNA 模板低。
产品组分
酶活单位定义
37 °C,60 min 内将 1 nmol 脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段所需的酶量定义为 1 个活性单位(U)。
保存、运输条件
-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输,避免反复冻融。
适用场景
Ø 合成同聚物和杂聚物;
Ø 线性双链 DNA 的 3’-OH 末端同聚物加尾;
Ø 寡聚脱氧核苷酸和 DNA 标记;
Ø 5’-RACE(快速扩增 cDNA 末端);
Ø 凋亡反应的原位定位。
工作条件
Ø 抑制剂:金属螯合剂、铵、氯化物、碘化物和磷酸盐离子。
Ø 失活:加入 EDTA,70 °C 加热 10 min。
注意事项
Ø 如果Reaction Buffer 中含有 CoCl2,其不能与下游应用兼容。需采用过柱离心法或苯酚/氯仿抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物,除去 CoCl2。
Ø 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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