产品概述

Heat-labile UDG由克隆有来自嗜冷海洋细菌(psychrophilic marine bacterium)UDG基因的重组E.coli菌株表达并经过多步纯化精制得到。UDG(Uracil-DNA Glycosylase，尿嘧啶-DNA糖基化酶)可催化水解含有dU的DNA单链或双链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键，释放游离尿嘧啶，由此产生的无碱基位点很容易被水解断裂。本品对高温敏感，50℃以上就可以使酶不可逆失活，适用于PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR体系。

产品组分  

酶活定义

在70 mM Tris-HCl，pH 7.5，10 mM NaCl，1 mM EDTA，100μg/ml BSA反应液中，37℃ 1 h内使1 nmol的尿嘧啶从含dU的DNA上释放所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

保存、运输条件

Ø -20℃保存，≤0℃运输。

Ø 有效期2年，避免反复冻融。

应用场景

去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基；去除含dU的PCR产物气溶胶污染。

注意事项

Heat-labile UDG酶在大多数PCR或RT-PCR体系中均具有活性，但对于自行使用的PCR或RT-PCR体系，首次使用时建议先测试一下是否和所使用的体系兼容。

反应程序

25℃	10 min	降解含U模板
95℃	2 min	UDG失活，模板变性
PCR反应
94℃	30 sec	30-40个循环
55℃	30 sec	30-40个循环
72℃	1 kb/60sec	30-40个循环
72℃	7 min	终延申

注：可根据实验需要调整PCR反应程序。