产品概述

在模板及引物存在的条件下，T4 DNA聚合酶催化沿5'→3'方向合成DNA。此酶还具有3'→5'核酸外切酶的活性，该活性比DNA聚合酶I强。与DNA聚合酶I不同，T4 DNA聚合酶不具有5'→3'核酸外切酶活性。

产品组分  

酶活单位定义

37℃、30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为1个活性单位(U)。

保存、运输条件

-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输，避免反复冻融。

适用场景

DNA链的3'突出末端切除或5'突出端补平，使DNA末端平滑化：

Ø DNA 末端钝化：填入5'-端或/和去除3'-端

Ø 用3’-dA 端钝化 PCR 产物

Ø 通过置换反应合成标记的 DNA 探针

Ø 寡核苷酸定点特异性诱变

Ø 非连接依赖性克隆PCR 产物

工作条件

10 × Reaction Buffer：100 mM Tris-HCl pH 7.9 @ 25℃;  500 mM NaCl; 100 mM MgCl2; 10 mM DTT。

注意事项

Ø 请使用高质量的模板。

Ø 请勿使用dUTP和带有尿嘧啶的引物和模板。

Ø 如实验需要，可适当提高Super-Fidelity DNA Polymerase的使用量，但50 μl 体系内酶量建议不要超过2 U。

Ø Super-Fidelity DNA Polymerase具有较强的校对活性。因此，如扩增产物需要进行TA克隆，加A之前必须进行DNA纯化。5.为了防止Super-Fidelity DNA Polymerase的校对活性降解引物，在配制反应体系时请最后加入聚合酶。